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タンパク質にタグをつけて検出する方法

タグをつける方法を調べようと思ってもなかなか論文から引っ張ってくるのは大変だった。
そこで、ここにメモしておく。

FLAGタグ

gac tac aag gac gac gat gac aaa


EEタグ

gaa gaa gaa gaa tat atg cct atg gaa
E E E E Y M P M E

KT3タグ

aag cct cct act cct cct cct gag cct gag act
K P P T P P P E P E T

HAタグ

tac cca tac gac gtt cca gat tac gct
Y P Y D V P D Y A

タグを挿入するには一般的に二つの方法がある。

ユニークな制限酵素サイトが挿入したい位置の前後にあればそこにタグをコードしたDNA断片を挿入する。
一つは、相補的なオリゴを作ってそれを挿入する。
pubmed

もう一つは、適切な制限酵素サイトがない場合、タグをPCRのプライマーにタグの配列をコードして挿入する。
pubmed